Most Probable Number (MPN) Test: Principle, Procedure, Results

Có phải bạn đang tìm kiếm chủ đề về => Most Probable Number (MPN) Test: Principle, Procedure, Results phải ko? Nếu đúng tương tự thì mời bạn xem nó ngay tại đây. Xem thêm các bài viết hay khác tại đây => Tin Tức

Cập nhật lần cuối vào ngày 29 tháng 5 năm 2021

Số xác suất hồ hết (MPN) là một phương pháp được sử dụng để ước tính nồng độ của vi sinh vật sống sót trong một mẫu bằng cách tái tạo sự tăng trưởng của môi trường lỏng ở độ pha loãng gấp mười lần. Nó thường được sử dụng để ước tính quần thể vi sinh vật trong đất, nước, các thành phầm nông nghiệp và đặc thù hữu ích với các mẫu có chứa vật liệu dạng hạt gây cản trở các phương pháp liệt kê số lượng tấm.

Bạn đang xem: mpn là gì

MPN được vận dụng phổ quát nhất để rà soát chất lượng nước, tức là để đảm bảo nước có an toàn hay ko về mặt vi khuẩn có trong đó. Một nhóm vi khuẩn thường được gọi là Coliforms trong phân hoạt động như một tín hiệu cho thấy nước bị nhiễm phân. Sự hiện diện của rất ít vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy rằng nước có thể ko chứa các sinh vật gây bệnh, trong lúc sự hiện diện của một số lượng lớn vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy khả năng rất cao là nước có thể chứa các sinh vật gây bệnh làm cho nước ko an toàn cho sự tiêu thụ.

Nguyên tắc

Nước cần rà soát được pha loãng theo dõi và cấy vào môi trường nuôi cấy lactose, các vi khuẩn coliform nếu có trong nước sẽ sử dụng lactose có trong môi trường để tạo ra axit và khí. Sự hiện diện của axit được biểu thị bằng sự thay đổi màu sắc của môi trường và sự hiện diện của khí được phát hiện lúc các bọt khí thu được trong ống Durham ngược có mặt trong môi trường. Số lượng coliform tổng số được xác định bằng cách đếm số lượng ống cho phản ứng dương tính (tức là cả sự thay đổi màu sắc và tạo khí) và so sánh kiểu kết quả dương tính (số lượng ống cho thấy sự tăng trưởng ở mỗi độ pha loãng) với các bảng thống kê tiêu chuẩn.

Rà soát MPN được thực hiện trong 3 bước

  1. Thử nghiệm giả thiết
  2. Rà soát xác nhận
  3. Đã hoàn thành bài rà soát

Thử nghiệm giả thiết

Thử nghiệm giả thiết là một thử nghiệm sàng lọc để lấy mẫu nước về sự hiện diện của các sinh vật coliform.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh. Tuy nhiên, nếu bất kỳ ống nào trong dãy có axit và khí thì nước đó được coi là ko an toàn và thử nghiệm đã xác thu được thực hiện trên ống có phản ứng dương tính.

Nóng: Cách hiểu đúng và vận dụng FCA – Incoterms duy nhất trong ngoại thương

Phương pháp thử nghiệm giả thiết không giống nhau đối với nước đã qua xử lý và chưa qua xử lý.

Yêu cầu

  • Trung bình: Nước lèo lactose hoặc nước lèo MacConkey hoặc nước lèo Lauryl tryptose (lactose)
  • Dụng cụ thủy tinh: Ống thử nhiều dung tích (20ml, 10ml, 5ml), ống Durham
  • Khác: Pipet Steril

Sẵn sàng phương tiện

  • Sẵn sàng môi trường (hoặc canh MacConkey hoặc canh đường lactose) ở nồng độ đơn và nồng độ gấp đôi.
  • Đối với nước thô hoặc nước bị xỉn màu:
    • Phân phối môi trường cường độ kép trong 10 ống (mỗi ống 10mL) và môi trường cường độ đơn vào 5 ống (mỗi ống 10 mL) và thêm một ống Durham ở vị trí ngược.
  • Đối với nước đã qua xử lý:
    • Phân phối môi trường cường độ kép vào 5 ống (mỗi ống 10mL) và 50 mL môi trường cường độ đơn trong 1 chai và thêm ống Durham ở vị trí ngược.
  • Rà soát các ống để đảm bảo rằng lọ bên trong chứa đầy chất lỏng và ko có bọt khí.
  • Khử trùng bằng hấp tiệt trùng ở áp suất 15 lbs (121 ° C) trong 15 phút.

Thứ tự rà soát MPN

Đối với nước thô (ô nhiễm)

Rà soát nước MPN
  1. Lấy 5 ống độ bền kép và 10 ống độ bền đơn cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  3. tương tự, thêm 1 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ đơn và 0,1 mL nước vào 5 ống còn lại chứa 10 mL môi trường cường độ đơn.
  4. Ủ tất cả các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được thử nghiệm cho kết quả là 3-2-1 (3 × 10 mL dương tính, 2 × 1 mL dương tính, 1 × 0,1 mL dương tính) cho trị giá MPN là 17, tức là mẫu nước chứa khoảng 17 coliform trên 100 ml

Để xem toàn thể bảng, hãy tải xuống tệp PDF từ liên kết được phân phối trong tài liệu tham khảo.

Đối với nước đã qua xử lý (ko bị ô nhiễm)

  1. Lấy 1 ống cường độ đơn (50mL) và 5 ống cường độ kép (10mL) cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 50 mL nước vào các ống chứa 50 mL môi trường cường độ đơn.
  3. tương tự, thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  4. Ủ các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được rà soát cho kết quả 1-4 (1 × 50 mL dương tính, 4 × 10 mL dương tính) cho trị giá MPN là 16, tức là mẫu nước ước tính chứa 16 coliform trên 100 mL.

Rà soát xác nhận

Một số vi sinh vật khác ngoài coliforms cũng tạo ra axit và khí từ quá trình lên men đường lactose. Để xác nhận sự hiện diện của coliform, một thử nghiệm khẳng định được thực hiện.

Từ mỗi ống lên men có kết quả dương tính, chuyển một vòng môi trường vào:

  1. 3 mL canh đường lactose hoặc ống lên men lactose màu xanh lá cây rực rỡ,
  2. tới một thạch nghiêng và
  3. 3 mL nước tryptone.

Ủ các ống lên men canh thang lactose đã cấy ở 37 ° C và rà soát sự tạo nên khí sau 24 ± 2 giờ. Nếu ko thấy khí sinh ra, hãy ủ tiếp tới tối đa 48 ± 3 giờ để rà soát sinh khí.

Các thanh thạch phải được ủ ở 37 ° C trong 24 ± 2 giờ và Chế phẩm nhuộm Gram được làm từ các thanh xiên nên được rà soát bằng kính hiển vi.

Xem thêm thông tin hay:  Cá Trắm Cỏ Thích ăn Gì Nhất? Kỹ Thuật Nuôi Cá Trắm Cỏ đúng Cách

Nóng: Cải thiện tiếng Anh là gì | Hỏi gì?

Sự tạo nên khí trong canh đường lactose và sự biểu lộ của trực khuẩn Gram âm, ko tạo bào tử trong thạch tương ứng cho thấy sự hiện diện của một thành viên của nhóm coliform trong mẫu được rà soát.

Việc ko tạo khí trong canh trường lactoza hoặc ko chứng minh được trực khuẩn Gram âm, ko tạo nên bào tử trong thạch nghiêng tương ứng được thử nghiệm âm tính (ko có coliform trong mẫu).

Thử nghiệm nước tryptone

  1. Ủ nước tryptone ở (44,5 ± 0,2 ° C) trong 18-24 giờ
  2. Sau lúc ủ, thêm khoảng 0,1mL thuốc thử Kovacs và trộn nhẹ.
  3. Các sự hiện diện của indole được biểu thị bằng màu đỏ trong thuốc thử Kovacs, tạo thành màng trên pha nước của môi trường.

Một. Các xét nghiệm khẳng định dương tính với indole, sự tăng trưởng và sinh khí cho thấy sự hiện diện của E. coli chất làm mát nhiệt. b. Sự tăng trưởng và sản xuất khí lúc ko có indole xác nhận coliform chịu nhiệt.

Đã hoàn thành rà soát

Vì một số kết quả dương tính từ xét nghiệm khẳng định có thể là sai, nên thực hiện các xét nghiệm đã hoàn thành. Đối với chất cấy này từ mỗi ống dương tính của phép thử khẳng định được vạch trên đĩa EMB hoặc thạch Endo.

Trong quá trình này, một vòng mẫu từ mỗi ống BGLB dương tính được vạch lên môi trường chọn lựa như Eosin Methylene Blue agar hoặc phương tiện của Endo. Mỗi đĩa một được ủ ở 37 ° C và một đĩa khác ở 44,5 ± 0,2 ° C trong 24 giờ.

Ủ nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) là để phát hiện E.coli chịu nhiệt.

Sau lúc ủ, tất cả các đĩa được rà soát sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu.

Đọc thêm: Hướng dẫn, thủ thuật về | Hỏi gì?

  • Coliforms tạo ra các khuẩn lạc có ánh kim loại màu xanh lục, giúp phân biệt với các khuẩn lạc ko phải coliform (ko có ánh kim). Sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu ở nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) cho thấy sự hiện diện của chất làm mát nhiệt E coli.

Ưu điểm của MPN

  • Dễ dàng giảng giải, bằng cách quan sát hoặc phát thải khí
  • Chất độc trong mẫu được pha loãng
  • Phương pháp hiệu quả để phân tích các mẫu có độ đục cao như cặn, bùn, bùn, v.v.
  • nhưng mà ko thể được phân tích bằng cách lọc màng.

xui xẻo của MPN

  • Phải mất một thời kì dài mới có kết quả
  • Kết quả ko chuẩn xác lắm
  • Yêu cầu nhiều phần cứng hơn (đồ thủy tinh) và phương tiện
  • Xác suất dương tính giả

Tài liệu tham khảo và đọc thêm

  1. WHO: Phương pháp nhiều ống cho chất làm mát nhiệt (Faecal Coliform)

Thông tin thêm

Most Probable Number (MPN) Test: Principle, Procedure, Results

Cập nhật lần cuối vào ngày 29 tháng 5 năm 2021

Số xác suất hồ hết (MPN) là một phương pháp được sử dụng để ước tính nồng độ của vi sinh vật sống sót trong một mẫu bằng cách tái tạo sự tăng trưởng của môi trường lỏng ở độ pha loãng gấp mười lần. Nó thường được sử dụng để ước tính quần thể vi sinh vật trong đất, nước, các thành phầm nông nghiệp và đặc thù hữu ích với các mẫu có chứa vật liệu dạng hạt gây cản trở các phương pháp liệt kê số lượng tấm.

Bạn đang xem: mpn là gì

MPN được vận dụng phổ quát nhất để rà soát chất lượng nước, tức là để đảm bảo nước có an toàn hay ko về mặt vi khuẩn có trong đó. Một nhóm vi khuẩn thường được gọi là Coliforms trong phân hoạt động như một tín hiệu cho thấy nước bị nhiễm phân. Sự hiện diện của rất ít vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy rằng nước có thể ko chứa các sinh vật gây bệnh, trong lúc sự hiện diện của một số lượng lớn vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy khả năng rất cao là nước có thể chứa các sinh vật gây bệnh làm cho nước ko an toàn cho sự tiêu thụ.

Nguyên tắc

Nước cần rà soát được pha loãng theo dõi và cấy vào môi trường nuôi cấy lactose, các vi khuẩn coliform nếu có trong nước sẽ sử dụng lactose có trong môi trường để tạo ra axit và khí. Sự hiện diện của axit được biểu thị bằng sự thay đổi màu sắc của môi trường và sự hiện diện của khí được phát hiện lúc các bọt khí thu được trong ống Durham ngược có mặt trong môi trường. Số lượng coliform tổng số được xác định bằng cách đếm số lượng ống cho phản ứng dương tính (tức là cả sự thay đổi màu sắc và tạo khí) và so sánh kiểu kết quả dương tính (số lượng ống cho thấy sự tăng trưởng ở mỗi độ pha loãng) với các bảng thống kê tiêu chuẩn.

Rà soát MPN được thực hiện trong 3 bước

  1. Thử nghiệm giả thiết
  2. Rà soát xác nhận
  3. Đã hoàn thành bài rà soát

Thử nghiệm giả thiết

Thử nghiệm giả thiết là một thử nghiệm sàng lọc để lấy mẫu nước về sự hiện diện của các sinh vật coliform.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh. Tuy nhiên, nếu bất kỳ ống nào trong dãy có axit và khí thì nước đó được coi là ko an toàn và thử nghiệm đã xác thu được thực hiện trên ống có phản ứng dương tính.

Nóng: Cách hiểu đúng và vận dụng FCA - Incoterms duy nhất trong ngoại thương

Phương pháp thử nghiệm giả thiết không giống nhau đối với nước đã qua xử lý và chưa qua xử lý.

Yêu cầu

  • Trung bình: Nước lèo lactose hoặc nước lèo MacConkey hoặc nước lèo Lauryl tryptose (lactose)
  • Dụng cụ thủy tinh: Ống thử nhiều dung tích (20ml, 10ml, 5ml), ống Durham
  • Khác: Pipet Steril

Sẵn sàng phương tiện

  • Sẵn sàng môi trường (hoặc canh MacConkey hoặc canh đường lactose) ở nồng độ đơn và nồng độ gấp đôi.
  • Đối với nước thô hoặc nước bị xỉn màu:
    • Phân phối môi trường cường độ kép trong 10 ống (mỗi ống 10mL) và môi trường cường độ đơn vào 5 ống (mỗi ống 10 mL) và thêm một ống Durham ở vị trí ngược.
  • Đối với nước đã qua xử lý:
    • Phân phối môi trường cường độ kép vào 5 ống (mỗi ống 10mL) và 50 mL môi trường cường độ đơn trong 1 chai và thêm ống Durham ở vị trí ngược.
  • Rà soát các ống để đảm bảo rằng lọ bên trong chứa đầy chất lỏng và ko có bọt khí.
  • Khử trùng bằng hấp tiệt trùng ở áp suất 15 lbs (121 ° C) trong 15 phút.

Thứ tự rà soát MPN

Đối với nước thô (ô nhiễm)

Rà soát nước MPN
  1. Lấy 5 ống độ bền kép và 10 ống độ bền đơn cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  3. tương tự, thêm 1 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ đơn và 0,1 mL nước vào 5 ống còn lại chứa 10 mL môi trường cường độ đơn.
  4. Ủ tất cả các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được thử nghiệm cho kết quả là 3-2-1 (3 × 10 mL dương tính, 2 × 1 mL dương tính, 1 × 0,1 mL dương tính) cho trị giá MPN là 17, tức là mẫu nước chứa khoảng 17 coliform trên 100 ml

Để xem toàn thể bảng, hãy tải xuống tệp PDF từ liên kết được phân phối trong tài liệu tham khảo.

Đối với nước đã qua xử lý (ko bị ô nhiễm)

  1. Lấy 1 ống cường độ đơn (50mL) và 5 ống cường độ kép (10mL) cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 50 mL nước vào các ống chứa 50 mL môi trường cường độ đơn.
  3. tương tự, thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  4. Ủ các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được rà soát cho kết quả 1-4 (1 × 50 mL dương tính, 4 × 10 mL dương tính) cho trị giá MPN là 16, tức là mẫu nước ước tính chứa 16 coliform trên 100 mL.

Rà soát xác nhận

Một số vi sinh vật khác ngoài coliforms cũng tạo ra axit và khí từ quá trình lên men đường lactose. Để xác nhận sự hiện diện của coliform, một thử nghiệm khẳng định được thực hiện.

Từ mỗi ống lên men có kết quả dương tính, chuyển một vòng môi trường vào:

  1. 3 mL canh đường lactose hoặc ống lên men lactose màu xanh lá cây rực rỡ,
  2. tới một thạch nghiêng và
  3. 3 mL nước tryptone.

Ủ các ống lên men canh thang lactose đã cấy ở 37 ° C và rà soát sự tạo nên khí sau 24 ± 2 giờ. Nếu ko thấy khí sinh ra, hãy ủ tiếp tới tối đa 48 ± 3 giờ để rà soát sinh khí.

Các thanh thạch phải được ủ ở 37 ° C trong 24 ± 2 giờ và Chế phẩm nhuộm Gram được làm từ các thanh xiên nên được rà soát bằng kính hiển vi.

Nóng: Cải thiện tiếng Anh là gì | Hỏi gì?

Sự tạo nên khí trong canh đường lactose và sự biểu lộ của trực khuẩn Gram âm, ko tạo bào tử trong thạch tương ứng cho thấy sự hiện diện của một thành viên của nhóm coliform trong mẫu được rà soát.

Việc ko tạo khí trong canh trường lactoza hoặc ko chứng minh được trực khuẩn Gram âm, ko tạo nên bào tử trong thạch nghiêng tương ứng được thử nghiệm âm tính (ko có coliform trong mẫu).

Thử nghiệm nước tryptone

  1. Ủ nước tryptone ở (44,5 ± 0,2 ° C) trong 18-24 giờ
  2. Sau lúc ủ, thêm khoảng 0,1mL thuốc thử Kovacs và trộn nhẹ.
  3. Các sự hiện diện của indole được biểu thị bằng màu đỏ trong thuốc thử Kovacs, tạo thành màng trên pha nước của môi trường.

Một. Các xét nghiệm khẳng định dương tính với indole, sự tăng trưởng và sinh khí cho thấy sự hiện diện của E. coli chất làm mát nhiệt. b. Sự tăng trưởng và sản xuất khí lúc ko có indole xác nhận coliform chịu nhiệt.

Đã hoàn thành rà soát

Vì một số kết quả dương tính từ xét nghiệm khẳng định có thể là sai, nên thực hiện các xét nghiệm đã hoàn thành. Đối với chất cấy này từ mỗi ống dương tính của phép thử khẳng định được vạch trên đĩa EMB hoặc thạch Endo.

Trong quá trình này, một vòng mẫu từ mỗi ống BGLB dương tính được vạch lên môi trường chọn lựa như Eosin Methylene Blue agar hoặc phương tiện của Endo. Mỗi đĩa một được ủ ở 37 ° C và một đĩa khác ở 44,5 ± 0,2 ° C trong 24 giờ.

Ủ nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) là để phát hiện E.coli chịu nhiệt.

Sau lúc ủ, tất cả các đĩa được rà soát sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu.

Đọc thêm: Hướng dẫn, thủ thuật về | Hỏi gì?

  • Coliforms tạo ra các khuẩn lạc có ánh kim loại màu xanh lục, giúp phân biệt với các khuẩn lạc ko phải coliform (ko có ánh kim). Sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu ở nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) cho thấy sự hiện diện của chất làm mát nhiệt E coli.

Ưu điểm của MPN

  • Dễ dàng giảng giải, bằng cách quan sát hoặc phát thải khí
  • Chất độc trong mẫu được pha loãng
  • Phương pháp hiệu quả để phân tích các mẫu có độ đục cao như cặn, bùn, bùn, v.v.
  • nhưng mà ko thể được phân tích bằng cách lọc màng.

xui xẻo của MPN

  • Phải mất một thời kì dài mới có kết quả
  • Kết quả ko chuẩn xác lắm
  • Yêu cầu nhiều phần cứng hơn (đồ thủy tinh) và phương tiện
  • Xác suất dương tính giả

Tài liệu tham khảo và đọc thêm

  1. WHO: Phương pháp nhiều ống cho chất làm mát nhiệt (Faecal Coliform)


Cập nhật lần cuối vào ngày 29 tháng 5 năm 2021

Số xác suất hồ hết (MPN) là một phương pháp được sử dụng để ước tính nồng độ của vi sinh vật sống sót trong một mẫu bằng cách tái tạo sự tăng trưởng của môi trường lỏng ở độ pha loãng gấp mười lần. Nó thường được sử dụng để ước tính quần thể vi sinh vật trong đất, nước, các thành phầm nông nghiệp và đặc thù hữu ích với các mẫu có chứa vật liệu dạng hạt gây cản trở các phương pháp liệt kê số lượng tấm.

Bạn đang xem: mpn là gì

MPN được vận dụng phổ quát nhất để rà soát chất lượng nước, tức là để đảm bảo nước có an toàn hay ko về mặt vi khuẩn có trong đó. Một nhóm vi khuẩn thường được gọi là Coliforms trong phân hoạt động như một tín hiệu cho thấy nước bị nhiễm phân. Sự hiện diện của rất ít vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy rằng nước có thể ko chứa các sinh vật gây bệnh, trong lúc sự hiện diện của một số lượng lớn vi khuẩn coliform trong phân sẽ cho thấy khả năng rất cao là nước có thể chứa các sinh vật gây bệnh làm cho nước ko an toàn cho sự tiêu thụ.

Nguyên tắc

Nước cần rà soát được pha loãng theo dõi và cấy vào môi trường nuôi cấy lactose, các vi khuẩn coliform nếu có trong nước sẽ sử dụng lactose có trong môi trường để tạo ra axit và khí. Sự hiện diện của axit được biểu thị bằng sự thay đổi màu sắc của môi trường và sự hiện diện của khí được phát hiện lúc các bọt khí thu được trong ống Durham ngược có mặt trong môi trường. Số lượng coliform tổng số được xác định bằng cách đếm số lượng ống cho phản ứng dương tính (tức là cả sự thay đổi màu sắc và tạo khí) và so sánh kiểu kết quả dương tính (số lượng ống cho thấy sự tăng trưởng ở mỗi độ pha loãng) với các bảng thống kê tiêu chuẩn.

Rà soát MPN được thực hiện trong 3 bước

  1. Thử nghiệm giả thiết
  2. Rà soát xác nhận
  3. Đã hoàn thành bài rà soát

Thử nghiệm giả thiết

Thử nghiệm giả thiết là một thử nghiệm sàng lọc để lấy mẫu nước về sự hiện diện của các sinh vật coliform.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh.

Nếu kết quả xét nghiệm giả thiết là âm tính thì ko cần thực hiện thêm xét nghiệm và nguồn nước được coi là an toàn về mặt vi sinh. Tuy nhiên, nếu bất kỳ ống nào trong dãy có axit và khí thì nước đó được coi là ko an toàn và thử nghiệm đã xác thu được thực hiện trên ống có phản ứng dương tính.

Nóng: Cách hiểu đúng và vận dụng FCA – Incoterms duy nhất trong ngoại thương

Phương pháp thử nghiệm giả thiết không giống nhau đối với nước đã qua xử lý và chưa qua xử lý.

Yêu cầu

  • Trung bình: Nước lèo lactose hoặc nước lèo MacConkey hoặc nước lèo Lauryl tryptose (lactose)
  • Dụng cụ thủy tinh: Ống thử nhiều dung tích (20ml, 10ml, 5ml), ống Durham
  • Khác: Pipet Steril

Sẵn sàng phương tiện

  • Sẵn sàng môi trường (hoặc canh MacConkey hoặc canh đường lactose) ở nồng độ đơn và nồng độ gấp đôi.
  • Đối với nước thô hoặc nước bị xỉn màu:
    • Phân phối môi trường cường độ kép trong 10 ống (mỗi ống 10mL) và môi trường cường độ đơn vào 5 ống (mỗi ống 10 mL) và thêm một ống Durham ở vị trí ngược.
  • Đối với nước đã qua xử lý:
    • Phân phối môi trường cường độ kép vào 5 ống (mỗi ống 10mL) và 50 mL môi trường cường độ đơn trong 1 chai và thêm ống Durham ở vị trí ngược.
  • Rà soát các ống để đảm bảo rằng lọ bên trong chứa đầy chất lỏng và ko có bọt khí.
  • Khử trùng bằng hấp tiệt trùng ở áp suất 15 lbs (121 ° C) trong 15 phút.

Thứ tự rà soát MPN

Đối với nước thô (ô nhiễm)

Rà soát nước MPN
  1. Lấy 5 ống độ bền kép và 10 ống độ bền đơn cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  3. tương tự, thêm 1 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ đơn và 0,1 mL nước vào 5 ống còn lại chứa 10 mL môi trường cường độ đơn.
  4. Ủ tất cả các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được thử nghiệm cho kết quả là 3-2-1 (3 × 10 mL dương tính, 2 × 1 mL dương tính, 1 × 0,1 mL dương tính) cho trị giá MPN là 17, tức là mẫu nước chứa khoảng 17 coliform trên 100 ml

Để xem toàn thể bảng, hãy tải xuống tệp PDF từ liên kết được phân phối trong tài liệu tham khảo.

Đối với nước đã qua xử lý (ko bị ô nhiễm)

  1. Lấy 1 ống cường độ đơn (50mL) và 5 ống cường độ kép (10mL) cho mỗi mẫu nước cần thử.
  2. Dùng pipet vô trùng thêm 50 mL nước vào các ống chứa 50 mL môi trường cường độ đơn.
  3. tương tự, thêm 10 mL nước vào 5 ống chứa 10 mL môi trường cường độ kép.
  4. Ủ các ống ở 37 ° C trong 24 giờ. Nếu ko có ống nào xuất hiện dương tính, ủ lại tới 48 giờ.
  5. So sánh số lượng ống cho phản ứng dương tính với biểu đồ tiêu chuẩn và ghi lại số lượng vi khuẩn có trong đó. Ví dụ, một mẫu nước được rà soát cho kết quả 1-4 (1 × 50 mL dương tính, 4 × 10 mL dương tính) cho trị giá MPN là 16, tức là mẫu nước ước tính chứa 16 coliform trên 100 mL.

Rà soát xác nhận

Một số vi sinh vật khác ngoài coliforms cũng tạo ra axit và khí từ quá trình lên men đường lactose. Để xác nhận sự hiện diện của coliform, một thử nghiệm khẳng định được thực hiện.

Từ mỗi ống lên men có kết quả dương tính, chuyển một vòng môi trường vào:

  1. 3 mL canh đường lactose hoặc ống lên men lactose màu xanh lá cây rực rỡ,
  2. tới một thạch nghiêng và
  3. 3 mL nước tryptone.

Ủ các ống lên men canh thang lactose đã cấy ở 37 ° C và rà soát sự tạo nên khí sau 24 ± 2 giờ. Nếu ko thấy khí sinh ra, hãy ủ tiếp tới tối đa 48 ± 3 giờ để rà soát sinh khí.

Các thanh thạch phải được ủ ở 37 ° C trong 24 ± 2 giờ và Chế phẩm nhuộm Gram được làm từ các thanh xiên nên được rà soát bằng kính hiển vi.

Nóng: Cải thiện tiếng Anh là gì | Hỏi gì?

Sự tạo nên khí trong canh đường lactose và sự biểu lộ của trực khuẩn Gram âm, ko tạo bào tử trong thạch tương ứng cho thấy sự hiện diện của một thành viên của nhóm coliform trong mẫu được rà soát.

Việc ko tạo khí trong canh trường lactoza hoặc ko chứng minh được trực khuẩn Gram âm, ko tạo nên bào tử trong thạch nghiêng tương ứng được thử nghiệm âm tính (ko có coliform trong mẫu).

Thử nghiệm nước tryptone

  1. Ủ nước tryptone ở (44,5 ± 0,2 ° C) trong 18-24 giờ
  2. Sau lúc ủ, thêm khoảng 0,1mL thuốc thử Kovacs và trộn nhẹ.
  3. Các sự hiện diện của indole được biểu thị bằng màu đỏ trong thuốc thử Kovacs, tạo thành màng trên pha nước của môi trường.

Một. Các xét nghiệm khẳng định dương tính với indole, sự tăng trưởng và sinh khí cho thấy sự hiện diện của E. coli chất làm mát nhiệt. b. Sự tăng trưởng và sản xuất khí lúc ko có indole xác nhận coliform chịu nhiệt.

Đã hoàn thành rà soát

Vì một số kết quả dương tính từ xét nghiệm khẳng định có thể là sai, nên thực hiện các xét nghiệm đã hoàn thành. Đối với chất cấy này từ mỗi ống dương tính của phép thử khẳng định được vạch trên đĩa EMB hoặc thạch Endo.

Trong quá trình này, một vòng mẫu từ mỗi ống BGLB dương tính được vạch lên môi trường chọn lựa như Eosin Methylene Blue agar hoặc phương tiện của Endo. Mỗi đĩa một được ủ ở 37 ° C và một đĩa khác ở 44,5 ± 0,2 ° C trong 24 giờ.

Ủ nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) là để phát hiện E.coli chịu nhiệt.

Sau lúc ủ, tất cả các đĩa được rà soát sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu.

Đọc thêm: Hướng dẫn, thủ thuật về | Hỏi gì?

  • Coliforms tạo ra các khuẩn lạc có ánh kim loại màu xanh lục, giúp phân biệt với các khuẩn lạc ko phải coliform (ko có ánh kim). Sự hiện diện của các khuẩn lạc tiêu biểu ở nhiệt độ cao (44,5 ± 0,2) cho thấy sự hiện diện của chất làm mát nhiệt E coli.

Ưu điểm của MPN

  • Dễ dàng giảng giải, bằng cách quan sát hoặc phát thải khí
  • Chất độc trong mẫu được pha loãng
  • Phương pháp hiệu quả để phân tích các mẫu có độ đục cao như cặn, bùn, bùn, v.v.
  • nhưng mà ko thể được phân tích bằng cách lọc màng.

xui xẻo của MPN

  • Phải mất một thời kì dài mới có kết quả
  • Kết quả ko chuẩn xác lắm
  • Yêu cầu nhiều phần cứng hơn (đồ thủy tinh) và phương tiện
  • Xác suất dương tính giả

Tài liệu tham khảo và đọc thêm

  1. WHO: Phương pháp nhiều ống cho chất làm mát nhiệt (Faecal Coliform)

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_3_plain]

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_1_plain]

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_2_plain]

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_2_plain]

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_3_plain]

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

[rule_1_plain]

Nguồn: besttaichinh.com

#Probable #Number #MPN #Test #Principle #Procedure #Results

Best Tài Chính
Best Tài Chínhhttp://besttaichinh.com
Là người sáng lập Website BestTaiChinh.Com - Với nhiều năm kinh nghiệm trong lĩnh vực tài chính ngân hàng, Bitcoin, chứng khoáng ... sẽ sử dụng các kiến thức được tổng hợp và đúc kết để cung cấp đến các bạn những thông tin chính xác, tư vấn hỗ trợ xử lý các dịch vụ tài chính, ngân hàng, bảo hiểm, đầu tư hiệu quả nhất!

Similar Articles

Comments

BÌNH LUẬN

Vui lòng nhập bình luận của bạn
Vui lòng nhập tên của bạn ở đây

Advertisment

Phổ biến nhất